Poliakrilamida elektroforesis gel (PAGE) ialah teknik yang digunakan secara meluas dalam biokimia, biologi molekul, dan kimia analitik untuk memisahkan dan menganalisis protein, asid nukleik, makromolekul lain berdasarkan saiz dan casnya. Poliakrilamida ialah matriks gel yang digunakan dalam teknik ini.

Berikut ialah gambaran keseluruhan proses:

1. Penyediaan Gel: Gel poliakrilamida dibentuk dengan pempolimeran monomer akrilamida dan bisakrilamida. Akrilamida menyediakan struktur gel, manakala bisakrilamida bertindak sebagai agen penghubung silang. Peratusan bisacrylamide menentukan saiz liang gel, mempengaruhi resolusi pemisahan untuk julat berat molekul yang berbeza. Gel biasanya dibuang dalam format menegak atau mendatar.

2. Pemuatan Sampel: Sampel yang mengandungi molekul yang akan diasingkan dicampur dengan agen pendenatur (cth., sodium dodecyl sulfate - SDS) dan agen penurunan (cth., β-mercaptoethanol) untuk menyahnaturasi dan menlinearkan molekul. Campuran biasanya dipanaskan untuk menyahnaturasi protein lagi. Caj elektrik ditambah kepada sampel untuk memudahkan pergerakan semasa elektroforesis.

3. Elektroforesis: Gel direndam dalam larutan penimbal dan diletakkan di antara dua elektrod. Molekul bercas negatif berhijrah ke arah elektrod bercas positif (anod) melalui matriks gel di bawah pengaruh medan elektrik. Kadar migrasi ditentukan oleh saiz dan cas molekul. Molekul yang lebih kecil bergerak lebih cepat dan berhijrah lebih jauh, manakala molekul yang lebih besar lebih perlahan dan kekal lebih dekat dengan kedudukan pemuatan.

4. Visualisasi: Selepas elektroforesis, molekul yang dipisahkan divisualisasikan menggunakan kaedah pewarnaan khusus untuk jenis molekul yang dianalisis. Contohnya, protein boleh diwarnakan dengan pewarnaan Coomassie Brilliant Blue atau perak, manakala asid nukleik boleh divisualisasikan dengan pewarna etidium bromida atau pendarfluor. Gel berwarna kemudiannya difoto atau diimbas untuk analisis.

5. Tafsiran: Corak atau profil jalur yang terhasil pada gel dianalisis untuk membuat kesimpulan maklumat tentang saiz, kuantiti dan ketulenan molekul yang diasingkan. Penanda berat molekul dengan saiz yang diketahui biasanya disertakan pada gel untuk membantu dalam menentukan saiz anggaran molekul yang tidak diketahui.

Poliakrilamida elektroforesis gel ialah teknik serba boleh yang boleh digunakan dalam pelbagai aplikasi, termasuk analisis protein, penjujukan DNA, pengklonan molekul, dan kajian kinetik enzim. Ia membolehkan penyelidik mengasingkan dan menggambarkan makromolekul berdasarkan ciri uniknya, membolehkan pemahaman yang lebih baik tentang struktur dan fungsinya.